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虾夷扇贝组织结构分析

发布时间:2019-11-09 01:55编辑:包装材料浏览(94)

    图片 1

    具体的操作步骤为:将组织块逐步移入70%酒精,80%酒精,90%酒精,95%酒精中各浸泡4 h,然后将组织块浸入100%酒精Ⅰ、Ⅱ各2 h,用滤纸吸干后再浸泡于无水酒精和二甲苯1∶1的混合液中10 min,再于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中浸泡20 min,因为酒精不能与石蜡混合,所以必须用二甲苯替换出酒精。

    0状态铝箔,表面应无油斑,表面刷水试验应不小于B级。

    铝箔刷水性能试验方法是利用不同液体在一固定材料表面的润湿性不同的原理,选择三种不同的试验液刷试铝箔表面,以判定铝箔表面的脱脂等级。

    在常温条件下进行试验。
    双合铝箔选择暗面进行检测。
    剥掉卷外圈铝箔至少3mm层厚。
    先用棉球蘸取备好的1号试验液沿铝箔的宽度方向刷试表面,将铝箔倾斜30°-50°观察铝箔表面的流线形状,如试验液呈流线状且润湿面积基本不收缩时,则表明被检铝箔刷水试验达到该试验液对应等级。
    如果试验液明显收缩或继续呈小球状时应选2号直至3号试验液进行刷试。
    刷水试验的判定等级按表I—34的规定。

    表1—34刷水试验的判定等级

    试验液呈流线状,且润湿基本不收缩

    2号:蒸馏水90mL酒精10Ml

    试验液呈流线状,且润湿基本不收缩

    3号:蒸馏水80mL酒精20Ml

    试验液呈流线状,且润湿基本不收缩

    实验对象:实验室已准备的铝箔

    实验结果:铝箔暗面显示为A级

    2.1实验照片

    染色所用的伊红染液可以在配制过程中选用伊红水溶液,这样制备相对简单,只需要用伊红加入水中充分溶解,质量不好可以加入少量的冰醋酸。对此种方法配制的伊红溶液与伊红醇溶液相比后者相对质量较好,所以实验过程中要尽可能的选取对实验有利的方法。

    伊红:为了使实验效果更好本次配制的伊红染液为醇溶性伊红,取伊红2.5 g加入蒸馏水慢慢搅动,再加入95%的酒精500 mL,在加入酒精的过程中要不停的搅拌,直到彻底溶解。此时的试剂有些浑浊,可取少量的冰醋酸加入到试剂中,试剂会逐渐变得澄澈,并且试剂颜色变为鲜红色。

    2.2.2虾夷扇贝鳃与草鱼鳃对比虾夷扇贝的鳃左右各一呈新月形,位于内脏团的两侧,前段从唇瓣的末端开始,一直延伸到肛门后方。鱼类的鳃由咽部后端两侧发生。构成相对复杂,胚胎期咽头内胚层形成一对鳃笼,向外侧伸展,向中胚层发展,正对鳃笼的外胚层向内陷入成为鳃沟,后继续发展形成鳃裂,咽头内腔与外界相通[12]。

    1.2.3血涂片制作选用5 mL的注射器抽取肝素钠2 mL,再从虾夷扇贝的心脏中抽取1 mL左右血液,从载玻片的一端滴一滴扇贝血液,左手拿玻片保持玻片水平,右手用另一个载玻片水平的轻轻将血液展平,置于阴凉处晾干,用相同方法制作五个血涂片。取其中两个用瑞氏染液染色,再取两个用吉姆萨染液染色,放于阴凉处晾干,清洗,留做后续观察。1.2.4组织切片的制作

    2.2.3虾夷扇贝肠与草鱼肠对比虾夷扇贝的肠划分为上行肠、下行肠以及直肠。下行肠出自胃的腹面中后部,从消化腺中传出来并插入生殖腺中,开始的部分呈囊行相对较宽,后面收缩向生殖腺的后面边缘延伸斜下抵达生殖腺末端,再沿着后端边缘向上转入上行肠。而草鱼的肠内表面多褶皱,并内壁附有小肠绒毛,增加消化吸收的表面积。

    1.2实验方法

    2.2.1虾夷扇贝血细胞与草鱼血细胞对比虾夷扇贝的血液呈浅蓝色,并不是一般动物所呈现的红色,因为其所含血细胞中主要为血蓝蛋白。虾夷扇贝的血细胞中无明显细胞质;而草鱼的血细胞中包括红细胞和白细胞,其中白细胞又含有淋巴细胞、单核细胞、嗜中性细胞、嗜碱性粒细胞以及血栓细胞等,草鱼的血细胞中不含有血小板,不过白细胞中含有血栓细胞能够起到与血小板相同的凝血作用。

    2.2.4虾夷扇贝肠与人类肠道对比虾夷扇贝的肠道与人类的肠道有很大的不同,人类的肠道内壁多褶皱并附有小肠绒毛,小肠绒毛中含有毛细血管以及毛细淋巴管,便于营养物质吸收,并且人体肠道内含有多种消化酶。

    玻片处理:取新载玻片置于大烧杯中,加洗衣粉适量以水使其能够没过载玻片,在电炉上加热煮沸15~20 min,流水冲洗,用滤纸擦干后使用。

    关键词:虾夷扇贝;血涂片;苏木素-伊红染色法;组织结构分析

    虾夷扇贝鳃:虾夷扇贝的鳃是呼吸系统的重要组成部分,其在内脏团的两侧,外观为新月形,鳃丝与鳃丝之间由纤毛相结合组成纤毛盘,在下行鳃板的下部和相对的上行鳃板的部分由结缔组织相连。

    脱水与透明:组织块经过固定清洗后还含有较多的水分,含有水分过多不便于后面浸蜡,只有通过酒精灯溶剂置换出水分后,使组织变硬,才能够为后续的实验做好铺垫。脱水的过程可能会使组织强烈收缩,致使组织变形如果太过着急。一般脱水使用的试剂为不同浓度的酒精。

    1.1实验材料

    实验准备工作要做好,防止实验过程中因为准备不充分影响试验进度或者实验最终品质,并且实验操作人员也要做好充足的准备,保证实验的操作正确性,规范性。

    染色和封片[10]:从烘箱中取出玻片于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中浸泡10 min,擦干后再移入100%、95%、90%、80%、70%的酒精中各2 min,后再放入蒸馏水中2 min,之后再放在苏木素溶液中染色7~10 min,用滤纸擦干后再放入盐酸酒精中焯一下反复三次,最后用自来水小水流冲洗20 min。冲洗后的玻片再置于伊红染液中染色7~10 min,再分别在70%,80%,90%的酒精中各洗三下,擦干后于95%的酒精Ⅰ、Ⅱ,100%酒精Ⅰ、Ⅱ中各5 min,后置入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各10 min,最后用中性树胶进行封片,晾干了之后进行显微镜的镜检和照相。

    图4虾夷扇贝外套膜

    图5虾夷扇贝肠

    包埋:取牛皮纸,折成小盒状并做好标记,先倒入熔好的石蜡,将浸蜡的组织块分别取出后置入小盒中,石蜡完全凝固后组织被包埋在其中,这一过程称为包埋,形成的小块叫做蜡块,该蜡块可以长久的保存。

    1.1.2实验药品瑞氏染色试剂盒、苦味酸、碘酸钠、明矾、95%乙醇、石蜡、氨水、柠檬酸、甘油、冰醋酸、盐酸羟胺、苏木素、伊红、钾明矾、中性树胶、二甲苯、100%乙醇、盐酸。

    3讨论

    虾夷扇贝于1982年引进我国[1]。其原产于日本、俄罗斯千岛群岛等地,主要分布于盐度较高,底质硬,淤沙少且水深不超过40 m的沿岸海区[2]。后引进我国,主要养殖区域集中在辽东半岛、山东长岛等海区,生长速度较慢。虾夷扇贝是近些年来贝类水产品的主要生产品种,其内含有大量蛋白质、EPA、DHA等对人体有益的成分[3]。具有相当高的营养经济价值。并且因为虾夷扇贝漂亮的外形,在我国南方将其称为“圆贝”,其圆满的造型象征着团聚、美满,雌雄半壳贝作为“鸳鸯喜贝”经常被搭配摆上婚宴餐桌,代表着对新人的祝福;同时虾夷半壳贝圆满的造型还是中秋佳节一家人团聚时候必不可少的美味佳肴,代表着团圆美好。

    取材:取材所用的组织应该保证新鲜,这样才可以保证其原有的形态学结构,保证实验的准确性。选取的组织尽量保证能够切取的体积为1.0 cm×1.0 cm×0.3 cm,以便能够使固定液较为充分的渗入组织内部,达到较好的固定作用。在切取组织的时候一定要保证刀具的锋利,切勿因为夹取组织过于用力使组织被挤压变形,影响最终实验品质。再有还要根据组织器官的结构选择合适的切面走向,同时要保证组织器官的清洁,如果组织表面有血渍、污物等要及时的用水冲洗,保证放入固定液之前组织的干净,实验过程每一步都要用滤纸擦干吸干组织表面然后再进行下一步。固定后的组织多少会有些许变形,此时要尽可能的将组织展开放平保证组织的外形和切取之前一致,以便于观察对比[9]。

    把虾夷扇贝作为实验材料,掌握虾夷扇贝血涂片的制作方法,并运用HE染色组织切片的方法对虾夷扇贝的组织结构进行观察以及分析。用5 mL注射器吸取2 mL肝素钠,抽取1 mL左右虾夷扇贝心脏血液,从载玻片一端滴一滴血液,左手水平拿着玻片,右手用另一个载玻片水平轻推血液,使其展平,在阴凉处风干,同样方法制取五个血涂片。留一个做空白对照,取两个血涂片用瑞氏染液染色,其他两个吉姆萨染液染色,放于阴凉处晾干留作观察。取新鲜扇贝组织切成1.0 cm×1.0 cm×0.3 cm的组织块,经过固定、脱水与透明、浸蜡、包埋等过程后把组织块切成4~6μm的石蜡切片。再经过苏木素染色盐酸酒精褪色,后用伊红染液复染等过程后用中性树胶完成封片,待干后进行显微镜的观察以及拍照。最后通过观察与人体以及鱼类相关的组织结构进行分析对比。

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